Sorbtsiya NA1. V spin-kolonki vnesti 3 obema svyazyvayushchego bufera po otnosheniyu k obemu obraztsa.
2. Add ves obem obraztsa posle bisulfitnoy konversii.
3. Mix smes perevorachivaniem kolonok.
4. Centrifuge kolonki v techenie 30 sekund pri 10-12 tys. ob/min. Udalit filtrat iz sobiratelnykh probirok.
Desulfirovanie i promyvka NA1. Add v kolonki 200 uL promyvochnogo bufera.
2. Centrifuge kolonki v techenie 30 sekund pri 10-12 tys. ob/min. Udalit filtrat iz sobiratelnykh probirok.
3. Add v kolonki 200 uL desulfiruyushchego bufera.
4. Incubate kolonki at room temperature 20 minut.
5. Centrifuge kolonki v techenie 30 sekund pri 10-12 tys. ob/min. Udalit filtrat iz sobiratelnykh probirok.
6. Dvazhdy povtorit punkty 1-2.
7. Centrifuge pustye spin-kolonki v techenie 1 minuty pri 10-12 tys. ob/min.
8. Perenesti spin-kolonki v novye tubes obemom 1,5-2 mL. Sobiratelnye tubes utilizirovat.
Nucleic acid elution1. Add na tsentr membrany spin-kolonok 22 uL elyuiruyushchego bufera. Incubate v techenie
5 minut at room temperature.
2. Centrifuge kolonki v techenie 1 minuty pri 10-12 tys. ob/min.
3. Utilizirovat spin-kolonki.
Optsionalno: dlya povysheniya vykhoda NA neobkhodimo povtorno nanesti filtrat na membranu kolonki.
Poluchennye rastvory modifitsirovannykh nucleic acids can be stored do 2 dney pri temperature ot +2°C do +4°C i do goda pri temperature -20°C.